在生物發(fā)酵過程中，pH值是影響微生物生長、代謝產(chǎn)物合成和工藝穩(wěn)定性的關鍵參數(shù)之一。發(fā)酵過程pH電極作為實時監(jiān)測pH的核心傳感器，其測量精度與響應速度直接關系到發(fā)酵過程的控制效果。然而，發(fā)酵環(huán)境復雜(高溫、高壓、高黏度、含蛋白和細胞碎片)，極易導致電極性能下降。掌握以下幾點關鍵知識，可顯著提升pH電極的使用效果與壽命。
1.選擇專用發(fā)酵電極
普通pH電極難以承受發(fā)酵罐的滅菌條件。應選用高壓滅菌型pH電極，其外殼為耐高溫材料(如PEEK或玻璃)，參比系統(tǒng)設計可耐受121℃、30分鐘以上的蒸汽滅菌。
2.正確安裝位置與角度
電極應安裝在發(fā)酵罐內(nèi)液體湍流區(qū)(如靠近攪拌槳出口)，避免靠近罐壁或液面。安裝角度建議為45°-60°斜向下，防止氣泡附著在敏感膜上影響測量。
3.滅菌前后的操作規(guī)范
滅菌前，確認電極已正確安裝，電纜接口密封良好。滅菌后，待罐內(nèi)溫度降至40℃以下再通電使用，防止熱沖擊損壞敏感膜。
4.定期校準至關重要
每次發(fā)酵批次開始前，必須在體外使用標準緩沖液進行校準。若發(fā)酵周期長(如7-14天)，建議中途進行在線校準或驗證。
5.防止污染與堵塞
發(fā)酵液中的蛋白質、細胞碎片易堵塞參比液接界，導致電位漂移。選用開放式或大孔徑液接界設計的電極，可減少堵塞風險。必要時可加裝自動清洗裝置(如定時噴淋)。
6.合理存儲
批次結束后，電極應拆下清洗，用去離子水沖洗干凈，浸泡在pH 4.01或電極專用儲存液中，嚴禁干放。
7.監(jiān)測電極性能指標
關注電極的零點(pH 7時mV值)和斜率(每pH單位mV變化)，正常斜率應在54-60 mV/pH(25℃)。若斜率低于50 mV/pH或響應時間超過2分鐘，表明電極老化，需更換。
8.避免機械損傷
安裝和清洗時避免碰撞攪拌槳或罐壁，防止玻璃膜破裂。
通過理解并實踐上述要點，可較大限度發(fā)揮發(fā)酵過程pH電極在發(fā)酵過程中的監(jiān)測效能，確保數(shù)據(jù)真實可靠，為精準控制發(fā)酵工藝、提高產(chǎn)物收率提供堅實的數(shù)據(jù)基礎。
